アブストラクト(16巻2号:神奈川歯学)

神奈川歯学

Japanese

Title : マウスの尿中生体アミンに関する研究 第1報 : ダンシル化によるヒスタミンの定量法
Subtitle : 原著
Authors : 秋場仁
Authors(kana) :
Organization : 神奈川歯科大学生化学教室
Journal : 神奈川歯学
Volume : 16
Number : 2
Page : 271-278
Year/Month : 1981 / 9
Article : 原著
Publisher : 神奈川歯科大学学会
Abstract : 「抄録」 現在, 血中あるいは組織中のヒスタミン測定については, 実用に供しうる方法が考案されている. しかし, 尿中ヒスタミンの測定は, 大動物のように尿量が多い場合での方法は報告されているが, マウスのような少量の尿試料を対象とした定量法はない. そこで本研究は, 微量の尿試料を対象として, しかも多検体処理能もよく, かつ検出感度および回収率にもすぐれた測定法の考案を目的として行なった. その結果, ヒスタミンをダンシル化した定量法を改良し, その方法の検討を行ない, 次のような測定法を開発した. マウス1日尿200μlを0.5M・ホウ酸緩衝液でpH9.0に調整し, これにダンシル・アセトン溶液(3.5mg/ml)を400μlを加えて, 37℃, 30分間暗室中でダンシル化を行なった. ついで, ダンシル化した尿試料を加水分解し, エチルエーテルを用いてダンシルと反応した物質を抽出し, さらにエーテル層を蒸発乾固した後に, クロロホルムを用いてダンシル・ヒスタミンを精製した. 精製試料5μlをシリカゲルプレートにスポットし, ベンゼン:トリエチルアミン(90:80, V:V)の溶媒で展開した. そして, 薄層上のダンシル・ヒスタミン(Rf0.32)の螢光強度をクロマトスキャナーで直接測定する. 本法の検出感度は1μg/mgであり, 回収率は86%以上であった. また, 本法は一次元薄層クロマトグラフ法を用いるため, 操作が簡便であり, 多検体の処理にすぐれた方法であることを確かめた. ちなみに, 本法を用いて測定したddYマウスの1日尿中におけるヒスタミン量は, 3.13±0.25μg/日であった.
Practice : 歯科学
Keywords :

English

Title : The Studies on Biogenic Amines in Urine of Mice 1 : The Measurement of Dansyl-histamine
Subtitle :
Authors : Chikashi AKIBA
Authors(kana) :
Organization : Department of Biochemistry, Kanagawa Dental College
Journal : Kanagawa Shigaku
Volume : 16
Number : 2
Page : 271-278
Year/Month : 1981 / 9
Article : Original article
Publisher : Kanagawa Odontological Society
Abstract : The qualitative and quantitative determiniation of dansyl-histamine in 200μl urine of mice has been developed. Hydrolyzed urine after dansylation was extracted with ethylether and the layer was evapolated in a water bath at 45℃ and then eluted with chroloform. The fraction of chroloform was spotted 5μl on Kieselgel 60 plates. The plates were developed by the ascending method in one direction. Benzen/Tri ethylamine (90 : 80 v : v) was used as solvent system. The fluorescent spot area of the histamine in the form of dansyl derivatives was directly measured on the plates after separation. The method was based on a rapid manually performed isolation of dansyl histamine of Rf values, and determination by the automatic TLC scanner with integral auto-calculation system. The determination of fluorescent dansyl-histamine on the plates may be subject to error due to photo chemical degradation. Accordingly, fluorescent decay were suppressed under the condition usually involved in quantitative determination system. Samples of urine of adult ddY male mice containing histamine were obtained at a concetration of 3.13+-0.25 μg/day.
Practice : Dentistry
Keywords :