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アブストラクト（23巻1号：神奈川歯学）
Japanese
| Title ： | 硬組織の細胞分化に関する生化学的研究 - ラット骨芽細胞に対するモノクローナル抗体の作製 - |
|---|---|
| Subtitle ： | 原著 |
| Authors ： | 木本茂成1),2), 檜垣旺夫1), 斎藤滋2) |
| Authors（kana） ： | |
| Organization ： | 1)神奈川歯科大学小児歯科学教室, 2)神奈川歯科大学口腔生化学教室 |
| Journal ： | 神奈川歯学 |
| Volume ： | 23 |
| Number ： | 1 |
| Page ： | 40-55 |
| Year/Month ： | 1988 / 6 |
| Article ： | 原著 |
| Publisher ： | 神奈川歯科大学学会 |
| Abstract ： | 「緒言」歯, 骨あるいは軟骨など, 硬組織の健全な成長発育の過程を理解するために, 各組織を形成する細胞の分化の過程を生化学的に解析することは必須の事柄であると考えられる. 近年, 培養技術の進歩やKohlerとMilsteinによるハイブリドーマ法の確立などによりモノクローナル抗体の作製と免疫組織化学への応用が広く行われるようになってきた. また, リンパ球の研究を通して, 分化抗原という概念が確立され, 特にヒトTリンパ球の分化と機能上のサブセットの研究は飛躍的に発展した. 今日では種々の組織において細胞分化のプローブとしてのモノクローナル抗体が作製されている. これらの細胞表面抗原は, 細胞周囲の環境の情報を遺伝物質に伝える上で重要な役割を果たしていると考えられるが, その機能に関してはほとんど解明されていない. 現在, ウィルス, 細菌, さらに細胞成分や表面抗原など数多くの物質に対するモノクローナル抗体が作製されており, 血清学的あるいは組織学的な診断に広く用いられている. |
| Practice ： | 歯科学 |
| Keywords ： | 骨芽細胞, Alkaline Phosphatase, モノクローナル抗体, ハイブリドーマ, フローサイトメーター |
English
| Title ： | Biochemical Study on Cell Differentiation in Hard Tissue - Preparation of a Monoclonal Antibody against Rat Osteoblasts - |
|---|---|
| Subtitle ： | Original article |
| Authors ： | Shigenari KIMOTO1),2), Morio Higaki1), Shigeru Saito2) |
| Authors（kana） ： | |
| Organization ： | 1)Department of Pedodontics, Kanagawa Dental College, 2)Department of Oral Biochemistry, Kanagawa Dental College |
| Journal ： | Kanagawa Shigaku |
| Volume ： | 23 |
| Number ： | 1 |
| Page ： | 40-55 |
| Year/Month ： | 1988 / 6 |
| Article ： | Original article |
| Publisher ： | Kanagawa Odontological Society |
| Abstract ： | Abstract : A monoclonal antibody was raised against rat osteoblasts. Osteoblast-rich cells (OB cells) were isolated by collagenase from calvaria of 2-day-old rat pups after removal of the connective tissue and periostea. Following monolayer culture for 3 days, the OB cells were treated with trypsin and cultured in suspension for an additional 12 hours in a glass flask. After cytochemical staining of the cells for alkaline phosphatase (ALP) activity, the cells with high ALP activity were sorted by flow cytometer and used to immunize mice as an antigen. Hybridomas were produced by cell fusion of mouse myeloma cells with spleen cells from immunized mice. Antibodies in hybridoma culture supernatant, and their binding activity to OB cells, were detected by ELISA. Cloning was carried out by limiting dilution with mouse thymocytes as feeder cells. One of the monoclonal antibodies obtained, 1.1.1-3.G7, was IgM type and demonstrated, by immunofluorescence staining, to bind with freshly isolated OB cells and the cells with high ALP activity cultured in suspension. The monoclonal antibody, 1.1.1-3.G7 was demonstrated by immunoblotting to react with 210-KD, 110-KD, 65-KD, 58-KD, 40-KD, 36-KD, 32-KD, 29-KD, 25-KD, 17-KD, and 15-KD molecules expressed on monolayer cultures of OB cells, and with the same fractions except 210-KD on suspension cultures prepared from monolayer culture with trypsin treatment. Results using a biotin-avidin protein blotting technique suggest that the fractions of from 210-KD to 15-KD molecules, as detected by monoclonal antibody, localize on the membrane surface of the OB cells. |
| Practice ： | Dentistry |
| Keywords ： | Alkaline Phosphatase |
