アブストラクト(34巻2/3号:神奈川歯学)

神奈川歯学

Japanese

Title : 新しいマウス腸管リンパ組織(cryptopatches:CP)の回収法と細胞解析
Subtitle : 原著
Authors : 斎藤恒, 石川博通*, 久保田英朗
Authors(kana) :
Organization : 神奈川歯科大学口腔外科学第II講座, *慶応義塾大学医学部微生物学教室
Journal : 神奈川歯学
Volume : 34
Number : 2/3
Page : 109-115
Year/Month : 1999 / 9
Article : 原著
Publisher : 神奈川歯科大学学会
Abstract : 腸管は独自の免疫系を発達させており腸管関連付属リンパ組織(gut-associated lymphoid tissue:GALT)と呼ばれている. GALTを構成するリンパ組織としては免疫応答誘導部位であるパイエル板(Peyer's patch:PP), 孤立リンパ小節(isolated lymphoid follicle:ILF)などの集合リンパ組織と, 免疫担当細胞である粘膜固有層リンパ球(lamina propria lymphocytes:LPL), 小腸上皮細胞間T細胞(intestinal-intraepithelial T lymphocytes: IEL)などが散在性に存在することが知られている. マウスIELはT細胞抗原受容体αβ鎖(T cell receptor αβ:TCRαβ)を発現するαβ-IELとT細胞抗原受容体γδ鎖(T cell receptor γδ:TCRγδ)を発現するγδ-IELが約半数ずつ存在し, 末梢ではみられない独自の表現型をもつサブセットのリンパ球が, 多数存在する. IELが胸腺由来T細胞とは異なる発達分化をする細胞である可能性は, 近年多くの実験結果から示されている1~20). そして, これらはおそらく腸管局所で発達分化することが示唆されている. そこで金森らは, IELが腸管局所で発達分化すると想定し, その解剖学的部位の検索を行う目的でマウス腸管組織をヘマトキシリン-エオジン染色にて検索し, 絨毛基部から陰窩の粘膜固有層中に多数のリンパ球小集積が存在することを見出し, クリプトパッチ(cryptopatches:CP)と命名した21). CPにはパイエル板や孤立リンパ小節に存在する濾胞形成がみられないばかりか, いわゆる濾胞関連上皮(follicle associated epithelium:FAE)で覆われていないことも明らかになった21). CPに集積するリンパ球の特性を追究するために, 各種リンパ球表面抗原に対するモノクローナル抗体を用いた免疫組織化学的検索を行ったところ21), CP細胞の大多数は, 骨髄の幹細胞や胸腺の未分化細胞が発現するレセプター型チロシンキナーゼであるc-kit(CD117)22), リンパ球系及びミエロイド系細胞膜上に存在するIL-7受容体(IL-7R:CD127)23), T細胞が発現する分化抗原であるThy 1(CD90), および白血球標識抗原であるLFA-1(lymphocyte function-associated antigen-1:CD11a)を発現していることが明らかとなった. また, 胸腺内でのT細胞分化, 成熟に重要なサイトカインの産生や, 胸腺での正の選択, 負の選択に関わるストローマ細胞のマーカーであるCD11cを発現する細胞も20~30%存在した. これに対し, 成熟したT細胞のマーカーでありTCR複合体の構成分子であるCD3, TCRαβ鎖, TCRγδ鎖, あるいはB細胞のマーカーであるB220(CD45R), B細胞の抗原受容体の構成分子であるμ鎖やκ鎖などを発現するCP細胞はきわめて少数であった. これらの特徴から判断してCPには未分化T細胞が存在する可能性が高いと考えられた. 本研究では, このCPをマウス腸管から摘出する方法と, そこからCP細胞を単離精製する方法を開発した. さらに, この方法で得られたCP細胞をフローサイトメトリーにより解析したのでその詳細について報告する.
Practice : 歯科学
Keywords : cryptopatches (CP), c-kit+ stem cell, intestinal itraepitherial, T cell (IEL)

English

Title : Isolation and Cell Analysis of Newly Identified Murine Gut Lymphoid Tissues (cryptopatches : CP)
Subtitle :
Authors : Hisashi SAITO, Hiromichi ISHIKAWA*, Eiro KUBOTA
Authors(kana) :
Organization : Second Department of Oral and Maxillofacial Surgery, Kanagawa Dental College, *Department of Microbiology, Keio University School of Medicine
Journal : Kanagawa Shigaku
Volume : 34
Number : 2/3
Page : 109-115
Year/Month : 1999 / 9
Article : Original article
Publisher : Kanagawa Odontological Society
Abstract : We identified multiple tiny lymphoid tissues in the murine intestinal crypto lamina propria. These novel lymphoid tissues were termed cryptopatches (CP). CP are visible stereomicroscopically from the serosa and are widely distributed in small numbers throughout the entire length of the small intestine. We isolated tiny fragment of the small intestine containing one CP by using an amputated and tapered 21 G needle. From one such fragment containing a CP and a fragment extracted from the region without CP, the mean lymphoid cells compartmentalized were 1,000 (range, 650 to 2,000) and 60 (range, 25 to 150), respectively. Flow cytometric analysis of isolated CP cells revealed a large fraction of cells in CP expresses c-kit, IL-7 R, and Thy 1, but not lineage markers (Lin : CD 3, B 220, Gr-1, Mac-1, and TBR-119). The presence of this phenotype suggested that the cells of CP could be T lineage-committed precursors.
Practice : Dentistry
Keywords : cryptopatches (CP), c-kit+ stem cell, intestinal itraepitherial, T cell (IEL)